在培養過程中，MEF需要在適宜的溫度（如37℃）和氣體環境（如95%的空氣和5%的二氧化碳）下進行。培養基的選擇也是影響細胞生長的關鍵因素，常用的培養基包括DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）添加適量的胎牛血清（FBS）和雙抗（抗生素）。

當細胞達到一定的密度（如80-90%的收縮程度）時，需要進行傳代培養。傳代時，一般使用胰蛋白酶等酶解物進行細胞解聚，并控制傳代比例（如1:2~1:4）。同時，定期更換培養基和控制細胞密度也是保持細胞健康生長的重要措施。

總的來說，小鼠胚胎成纖維細胞的生長特性體現了其旺盛的生命力和增殖能力，這使得它們成為生物學和醫學研究中的重要工具。